A549/Adr阿霉素耐药株烧瓶培养的处理程序:
在培养瓶中接种细胞并在培养基中完全埴充培养基以防止运输过程中细胞的丢失。
1.收到后,目视检查培养物是否有微生物污染的宏观证据。使用倒置显微镜(配备有相位传感器),仔细检查是否有微生物污染的证据。还检查以确定大多数细胞是否仍然附著在烧瓶底部?在运输过程中,培养物有时被粗略地处理,并且许多细胞经常分离并县浮在培养基中。
2、如果细胞仍然附著,无菌去除5至10毫升的运输介质。可以节省运输媒介以重复使用。在5%C的空气中,在37°C下培养细胞,直到它们准备进行传代培养。
3.如果细胞没有附着,无萄地移除烧瓶的全部内容物,并以1000rpm离心5至10分钟。取出运输介质并保存。在10毫升这种培养基中重新沉淀颗粒细胞并加入25厘米的烧瓶中。在空气中5%°C下,在37°C下孵育,直至细胞准备进行传代培养。
阿霉素耐药株细胞培养小技巧:
1.买细胞要去靠谱的地方买,比如ATCC或者素冉生物。一般上面会有针对细胞的介绍,这样培养之前可以了解细胞正常生长的状态图、传代、培养基的类型等。
2.不管是买的细胞,还是别人惠赠的细胞,刚拿到手赶紧的做两件事:检测是否有支原体污染;迅速扩增冻存,冻存细胞复苏后第二天更换一次培养基。
3.发现细胞有污染迅速处理掉,特别是当你养了很多种细胞时。细菌污染、真菌污染很容易发现,支原体污染的话,细胞会长的慢,可以买个支原体检测的试剂盒定期检测一下。
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A549/Adr阿霉素耐药株